Poziom ekspresji defensyny DEFB4A w różnicowaniu rogowiaka kolczystokomórkowego, raka kolczystokomórkowego i raka podstawnokomórkowego

Mariola Wyględowska-Kania¹, *Joanna Gola², Anna Uttecht-Pudełko², Dominika Wcisło-Dziadecka⁴, Małgorzata Kapral³, Barbara Strzałka-Mrozik², Celina Kruszniewska-Rajs², Magdalena Tkacz⁵, Urszula Mazurek², Ligia Brzezińska-Wcisło¹

Streszczenie
Wstęp. Defensyny stanowią grupę peptydów o aktywności antybakteryjnej, antywirusowej i antygrzybiczej. Uczestniczą także w indukcji odpowiedzi immunologicznej i przeciwnowotworowej. Zmiany w poziomie ekspresji defensyn były badane w wielu patologiach skórnych, m.in. w łuszczycy, atopowym zapaleniu skóry, a także w niemelanotycznych nowotworach skóry (raku kolczystokomórkowym – SCC i raku podstawnokomórkowym – BCC).
Cel pracy. Celem tej pracy była ocena profilu mRNA genów kodujących defensyny oraz białka zaangażowane w indukcję ich ekspresji jako dodatkowego markera niemelanotycznych patologii skórnych: SCC, BCC i rogowiaka kolczystokomórkowego (KA).
Materiał i metody. Wycinki uzyskano z centralnej części guza (KA, SCC i BCC) i marginesów tkanki zdrowej. Profil mRNA genów kodujących defensyny oraz białka zaangażowane w indukcję ich ekspresji został wyznaczony techniką mikromacierzy oligonukleotydowych (Affymetrix). Walidację wyników przeprowadzono techniką QRT-PCR w czasie rzeczywistym.
Wyniki. Analiza techniką mikromacierzy wykazała zmiany profilu mRNA genów powiązanych z defensynami. We wszystkich guzach stwierdzono nadekspresję mRNA defensyny 2 (ang. defensin beta 2 – DEFB4A), w porównaniu do kontroli. Analiza techniką QRT-PCR w czasie rzeczywistym wykazała wzrost liczby kopii mRNA DEFB4A zarówno w KA, jak i SCC w porównaniu do BCC.
Wnioski. Poziom mRNA defensyny 2 jest przydatnym narzędziem w różnicowaniu KA i SCC od BCC. Rogowiak kolczystokomórkowy i rak kolczystokomórkowy nie mogą być różnicowane na podstawie liczby kopii mRNA DEFB4A.

Summary
Introduction. Defensins are peptide with antimicrobial, antiviral, antifungal activities and many other functions, such as induction of immunological response and antitumor activity. Changes in expression level of defensins was studied in many skin pathologies, including dermatological lesions such as psoriasis, atopic dermatitis and non-melanoma skin cancers (squamous cell carcinoma – SCC and basal cell carcinoma – BCC).
Aim. The objective of this study was to evaluate the mRNA profile of defensin-related genes’ transcripts as an additional molecular marker of non-melonoma skin pathologies: SCC, BCC and keratoacanthoma (KA).
Material and methods. Tissue samples were obtained from the central part of tumours (KA, SCC and BCC) and healthy margins. mRNA profile of genes coding defensins and proteins involved in their activation was determined using oligonucleotide microarrays (Affymetrix). Validation of the microarray analysis was performed using real-time QRT-PCR.
Results. Microarray analysis revealed changes in defensin-related genes’ profile. In all tumours DEFB4A (defensin beta 2) mRNA was up-regulated, compared with the healthy skin margins. Real-time QRT-PCR analysis showed increased DEFB4A transcript level both in KA and SCC comparing to BCC.
Conclusions. Defensin beta 2 mRNA level is a useful tool for the differentiation of KA and SCC from BCC. KA and SCC cannot be differentiated on the basis of the DEFB4A mRNA level.

To jest tylko fragment artykułu. Aby przeczytać całość, przejdź do Czytelni medycznej.