TSH signal transduction in thyroid cells of Nthy-ori 3-1 line**

© Borgis - Postępy Nauk Medycznych 11/2011, s. 924-928

*Urszula Piotrowska¹, Grażyna Adler¹, Urszula Mackiewicz²

Streszczenie
W poniższej pracy badano białka błonowe oraz wewnątrzkomórkowe szlaki sygnalizacyjne uruchamiane pod wpływem TSH w komórkach tarczycy linii Nthy-ori 3-1. Białka w solubilizowanych błonach komórkowych charakteryzowano metodą immunoblotingu z użyciem przeciwciał przeciwko receptorowi TSH i podjednostkom α i β regulatorowego białka G. Sygnalizację wewnątrzkomórkową uruchamianą przez TSH badano przez pomiar aktywności cyklazy adenylanowej i pomiar stężenia wewnątrzkomórkowego Ca²⁺. Wykazano występowanie w błonach komórek linii Nthy-ori 3-1 receptora TSH oraz wszystkich czterech podstawowych klas białka G: G_s, G_q, G_i i G_12/13 jak również występowanie podjednostek Gβ. Stwierdzono, że egzogenny TSH aktywuje procesy zachodzące z udziałem wykazanych białek, a więc stymuluje aktywność cyklazy adenylanowej i wzrost wewnątrzkomórkowego stężenia jonów Ca²⁺. Poziom tej stymulacji w komórkach Nthy-ori 3-1 jest jednak niższy niż w komórkach tarczycy z pierwotnej hodowli oraz transferowanych komórkach CHO prezentujących receptor TSH.

Summary
The paper characterizes proteins and intracellular signaling activating under TSH stimulation in thyroid cells of Nthy-ori 3-1 line. Solubilized cell membrane proteins from Nthy-ori 3-1 cells were characterized by immunoblotting with antibodies against TSH receptor and G-protein α and β subunits. Intracellular G-protein-dependent signal transmission was investigated by assaying adenylate cyclase activity and intracellular Ca²⁺ concentration under TSH stimulation. TSH receptor and all four classes of G protein: G_s, G_q, G_i, and G_12/13 and the G protein subunits β were present in membrane fraction of Nthy-ori 3-1 cells. In accordance with the presence of these proteins known to participate in signal transduction in thyroid cells, TSH treatment led to adenylate cyclase stimulation and intracellular Ca²⁺ rise. The results show, however, that the response of Nthy-ori 3-1 thyroid cells to TSH stimulation as adenylate cyclase activation and intracellular Ca²⁺ mobilization is weaker than that of thyroid cells in primary culture or transfected CHO cells expressing TSH receptor.

To jest tylko fragment artykułu. Aby przeczytać całość, przejdź do Czytelni medycznej.