Ekspresja NrCAM w rakach brodawkowatych tarczycy

Barbara Górka, Joanna Skubis-Zegadło, *Barbara Czarnocka

Streszczenie
Wstęp: Białko adhezyjne NrCAM z rodziny immunoglobulinopodobnych białek adhezyjnych występujące głównie w układzie nerwowowym, jak wykazano ulega również ekspresji w innych tkankach, w tym w nowotworach. Białka adhezyjne odgrywają ważną rolę w takich procesach jak wzrost i różnicowanie komórek. Zmiany w adhezji międzykomórkowej mogą być związane ze wzrostem inwazyjności komórek nowotworowych. W związku z tym, że cząsteczka NrCAM jest coraz częściej łączona z procesami nowotworzenia w niniejszej pracy badano ekspresję NrCAM w raku brodawkowatym tarczycy, najczęściej występującym raku tarczycy.
Materiał i metody: Analizie poddano grupę 46 brodawkowatych raków tarczycy i odpowiadających im tkanek prawidłowych. Badano poziom mRNA NrCAM metodą ilościowej reakcji PCR w czasie rzeczywistym (Q-RT-PCR), oraz poziom i lokalizację komórkową białka NrCAM stosując metody immunologiczne: immunohistochemię (IHC) i Western blot.
Wyniki: Wykazano, że ekspresja mRNA NrCAM w rakach jest znamiennie statystycznie wyższa niż w prawidłowych tarczycach (p<0,0001). W badaniu IHC ponad 95% (44/46) przypadków raka brodawkowatego tarczycy dawało pozytywny wynik barwienia NrCAM. Białko było głównie zlokalizowane cytoplazmatycznie, a w niektórych przypadkach widoczne było znakowanie błonowe. W tkankach prawidłowych obserwowano reakcję tylko w pojedynczych pęcherzykach wykazujących cechy nadczynności. Analiza Western blot potwierdziła wyniki otrzymane metodą Q-RT-PCR i wykazała, że ekspresja białka NrCAM w rakach brodawkowatych jest wyższa niż w odpowiadających im tkankach prawidłowych. Poziom ekspresji genu i białka NrCAM w raku brodawkowatym tarczycy nie był związany z klinicznym zaawansowaniem guza.
Wnioski: Uzyskane wyniki wykazały po raz pierwszy, że w rakach brodawkowatych tarczycy jest indukcja genu i białka neuronalnej czasteczki adhezyjnej NrCAM. Wysoki poziom transkryptu i jego białka nie korelował ze stopniem zaawansowania raków i ich wielkością.
Nasze wyniki sugerują, że nadekspresja NrCAM może być związana z patogenezą raków brodawkowatych tarczycy.

Summary
Introduction: Neuronal cell adhesion molecule NrCAM is mostly expressed in the nervous system and as recently described is also expressed in a variety of tissues, including tumours. Cell adhesion molecules plays an important role during basal cells processes like the cell growth and differentiation. Changes in the integrity of the adhesion are involved in tumours development and may lead to invasive and metastatic behavior of these cells. NrCAM expression has been linked to tumorigenesis of some tissues, therefore in this study we examined NrCAM expression in the most common type of thyroid cancer, papillary thyroid carcinoma.
Materials and methods: We analysed 46 of papillary thyroid carcinomas and paired normal tissues. NrCAM expression was analysed on both mRNA (Q-RT-PCR) and protein level and cellular localization using immunohistochemistry (IHC) an Western blot methods.
Results: Expression of NrCAM transcript was significantly higher in tumours, than in normal thyroid (p<0,0001). Immunohistochemistry showed that over 95% of papillary thyroid carcinomas (44/46) were positive for NrCAM expression. The protein localized in the cytoplasm, however in some cases the membranous localization was also observed. In normal thyroid immunostaining was limited to the rare follicles showing features of hyperactivity. Western blot corroborated both Q-RT-PCR and immunohistochemistry results showing higher protein level in cancer than in paired normal thyroid. NrCAM expression is up-regulated in PTC compared to the normal thyroid on both transcript and protein level whatever the tumor grade or stage.
Conclusions: This study is the first demonstration that NrCAM is over-expressed in human papillary thyroid carcinomas on both mRNA and protein levels, whatever the tumor stage and grade.
Our results suggest that up-regulation of NrCAM may be involved in the pathogenesis and behavior of papillary thyroid cancer.

To jest tylko fragment artykułu. Aby przeczytać całość, przejdź do Czytelni medycznej.