Monitorowanie ilości mRNA BCR-ABL u chorych
na przewlekłą białaczkę szpikową leczonych przeszczepieniem allogenicznych macierzystych komórek krwiotwórczych*

*Iwona Solarska¹, Barbara Nasiłowska-Adamska², Jan Maciej Zaucha³, Piotr Rzepecki⁴,
Małgorzata Całbecka⁵, Kazimierz Sułek⁶, Andrzej Hellmann³, Bożena Mariańska²,
Mirosław Majewski¹, Krzysztof Warzocha¹

Streszczenie
Wstęp. Monitorowanie choroby resztkowej metodą real-time PCR (RQ-PCR) u chorych na przewlekłą białaczkę szpikową (PBS) leczonych allotransplantacją macierzystych komórek krwiotwórczych (alloHSCT) jest skuteczną metodą umożliwiającą wczesne stwierdzenie wznowy choroby i podjęcie odpowiednich działań terapeutycznych, zapobiegających pełnoobjawowej wznowie białaczki.
Materiały i metody. Do badań zakwalifikowano 66 chorych na PBS, u których przeprowadzono ocenę ilościową mRNA BCR-ABL w okresie od 1 miesiąca do 12 lat po alloHSCT. Krew obwodową i/lub szpik kostny badano w tym celu w odstępach 1, 3, 6 lub 12-miesięcznych, zarówno metodą RT/nested PCR i RQ-PCR. Wyniki ekspresji genu BCR-ABL przedstawiono metodą pośrednią i wyrażono jako stosunek ilości kopii genu BCR-ABL do ABL w każdej próbce i odniesiono do średnich wartości współczynnika BCR-ABL/ABL wyliczonego w protokole Europe Against Cancer (EAC).
Wyniki. Na podstawie ilości transkryptu BCR-ABL, stwierdzanej po alloHSCT badana grupa chorych została zakwalifikowana do 3 podgrup. Grupa 35 chorych ze stale niskim poziomem transkryptu BCR-ABL, grupa 11 chorych ze zmiennym poziomem BCR-ABL oraz 18 chorych z wysokim poziomem transkryptu BCR-ABL. Na podstawie kryteriów molekularnych u 8 chorych stwierdzono wznowę molekularną PBS po alloHSCT. Wykazano korelację pomiędzy ilością transkryptu BCR-ABL, a ryzykiem wystąpienia wznowy białaczki i czasem wolnym od nawrotu białaczki.
Wnioski. Technika RQ-PCR jest czułą metodą do badania choroby resztkowej w PBS. Umożliwia monitorowanie kinetyki zmian ilości transkryptu BCR-ABL i wczesne wykrycie wznowy białaczki.

Summary
Introduction. Monitoring of minimal residual disease (MRD) has become necessary step in chronic myeloid leukemia (CML) after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (alloHSCT). The goal of early MRD detection is to give a chance of therapeutic intervention before hematologic relapse.
Materials and methods. The study included 66 CML patients with mRNA BCR-ABL quantification performed 1 month to 12 years after alloHSCT. Peripheral blood/bone marrow samples were tested every 1, 3, 6 - 12 months after alloHSCT for the presence of BCR-ABL transcripts, using RT-PCR/nested PCR and RQ-PCR. Quantification of BCR-ABL was performed according to the protocol of ´Europe Against Cancer´ (EAC). BCR-ABL expression was normalized with endogenous control ABL gene and expressed as BCR-ABL/ABL ratio compared to median expression values of BCR-ABL/ABL from EAC protocol.
Results. Patients were allocated into 3 categories according to the amount of BCR-ABL transcript after alloHSCT. Group 1 consisted of 35 patients with stable-low levels of detectable BCR-ABL transcripts. Group 2 of 11 patients with fluctuating-low level of BCR-ABL transcripts, and group 3 of 18 patients with high BCR-ABL levels. Based on molecular criteria 8 patients were relapsed. A strong correlation was found between the levels of BCR-ABL transcripts and incidence of molecular relapse and relapse-free survival.
Conclusions. RQ-PCR is a valuable method of quantification of BCR-ABL expression in CML patients after alloHSCT. It allows to monitor the kinetics of BCR-ABL transcripts and is useful in prediction of disease relapse.

To jest tylko fragment artykułu. Aby przeczytać całość, przejdź do Czytelni medycznej.