Częstość krzyżowej rearanżacji genów kodujących receptor T-komórkowy u chorych na ostrą białaczkę limfoblastyczną B-komórkową*

*Hanna Makuch-Łasica, Grażyna Nowak, Mirosław Majewski, Krzysztof Warzocha

Streszczenie
Wstęp. Rearanżacje genów kodujących części zmienne łańcuchów receptora limfocytów T (TCR) oraz immunoglobulin (IG) mogą być swoistymi markerami w monitorowaniu leczenia ostrych białaczek limfoblastycznych (OBL). W pracy określono częstość klonalnej rearanżacji genów IG i TCR u dorosłych chorych na OBL wywodzącej się z prekursorów limfocytów B (OBL-B) (tzw. krzyżowa rearanżacja).
Materiały i metody. U 36 dorosłych chorych na OBL-B wykonano badania molekularne RT-PCR na obecność genów fuzyjnych, w tym BCR-ABL, TEL-AML i MLL-AF4. Badanie rearanżacji genów łańcuchów ciężkich (IGH) i lekkich kappa/lambda (IGK/IGL) immunoglobulin (IG) oraz receptora T-komórkowego (TCR) gamma (TCRG), TCR delta (TCRD) i TCR beta (TCRB) przeprowadzono metodą multiplex PCR i analizą heterodupleksową. Startery i warunki reakcji dla oceny genów fuzyjnych opracowano zgodnie z protokołem BIOMED-1, a dla rearanżacji genów IG/TCR według protokołu BIOMED-2.
Wyniki. Obecność genów fuzyjnych stwierdzono u 36% chorych z OBL-B, w tym BCR-ABL u 25%, TEL-AML1 u 8% i MLL-AF4 u 3%. Klonalne rearanżacje genów kodujących IG wykryto we wszystkich badanych przypadkach. Części zmienne TCR wykryto u 97% chorych, w tym TCRG i TCRD u 58% oraz TCRB u 47% chorych. Istotnym było wykrycie monoklonalnych rearanżacji TCR u chorych, u których nie wykryto obecności genów fuzyjnych.
Wnioski. Badanie rearanżacji genów TCRB, TCRG i TCRD może służyć jako marker w wykrywaniu i monitorowaniu choroby resztkowej (MRD) u większości dorosłych chorych na OBL-B, szczególne w przypadkach, w których nie wykryto innych aberracji cytogenetycznych.

Summary
Background. T-cell (TCR) and immunoglobulin (IG) variable gene rearrangements are patient-specific targets for clonality studies and monitoring of acute lymphoblastic leukemia (ALL). The aim of our study was to investigate the incidence of clonal TCR and IG genes rearrangements in adult precursor B-cell ALL (B-ALL) (cross-lineage rearrangements).
Materials and methods. The study included 36 newly diagnosed B-ALL patient studied by RT-PCR for the presence of fusion genes, including BCR-ABL, TEL-AML i MLL-AF4 as well as cross-lineage rearrangements of T-cell receptor (TCR) and immunoglobulin (IG) genes. Rearrangements of heavy (IGH) and light kappa/lambda (IGK/IGL) as well as TCR beta (TCRB), TCR gamma (TCRG), and TCR delta (TCRD) genes were analyzed by multiplex PCR in combination with heteroduplex analysis in polyacrylamide gel. Primers and PCR reactions of fusion genes were performed according to BIOMED-1 protocol and rearrangements of IG/TCR genes using BIOMED-2 protocol.
Results. Fusion genes were found in 36% of ALL-B, patients including 25% BCR-ABL, 8% TEL-AML1, and 3% MLL-AF4. Clonal rearrangements of IG genes were found in all studied patients, while cross-lineage TCR genes rearrangements were detected in 97% of B-ALL patients, including 58% TCRG and TCRD genes and 47% TCRB. It is worth noting that cross-lineage TCR gene rearrangements were found in patients with no fusion genes.
Conclusions. The heteroduplex PCR data indicate that TCRB, TCRG and TCRD are suitable targets for minimal residual disease (MRD) monitoring in the majority of adult B-ALL patients. This method seems especially recomended for patients with no other clonal abnormalities.

To jest tylko fragment artykułu. Aby przeczytać całość, przejdź do Czytelni medycznej.